南京科捷丨挑战:你敢来探究液相色谱流动相的奥妙吗?
一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
选好填料(固定相)后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k降低;而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子k升高。因此,k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流动相的粘度成反比。所以选择流动相时应考虑以下几个方面:
①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。
②纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。
③必须与检测器匹配。使用UV检测器时,所用流动相在检测波长下应没有吸收,或吸收很小。当使用示差折光检测器时,应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相,以提高灵敏度。
④粘度要低(应<2cp)。高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质,降低柱效,还会使柱压降增加,使分离时间延长。选择沸点在100℃以下的流动相。
⑤对样品的溶解度要适宜。如果溶解度欠佳,样品会在柱头沉淀,不但影响了纯化分离,且会使柱子恶化。
⑥样品易于回收。应选用挥发性溶剂。
LC600A 高效液相色谱仪
LC600A 高效智能全控液相色谱仪由 P600 高压恒流泵与 UV600 紫外检测器直接构成等度 / 梯度分析系统。使用 WS600 工作站可以同时控制数台 P600 高压恒流泵、UV600 紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。
特点:
✦LC-P600高压恒流泵
(1)往复式并联泵设计,流量精度高,压力脉动小,延长密封圈和 活塞杆的使用寿命;
(2)隔膜式秒冲阻尼器与电子脉动抑制技术同时控制压力脉动保障 最低的基线噪音;
(3)整体性单向阀,结构简单,密封性好;
(4)柱塞杆自动缩进,方便更换密封圈;
(5)可选配注后清洗功能,适用于使用含缓冲盐的分析条件。
✦UV600紫外检测器
(1)平行双锥孔设计的流动池,大幅提高信噪比,检测效果更佳;
(2)开机自检功能,通过图谱上486.6nm和656nm这二点的位置, 以判断波长示值误差的准确性,保证极优的波长精度,保障仪器最佳状态;
(3)控制电路采用多微处理器结构,分别管理信号采集、数据处理、 系统控制和通信。在做等度分析时,可以方便的通过全汉字的液晶屏与七 个功能键,设置波长、滤波常数、输出量程、运行时间等参数。并且可以 实现开关氘灯,光谱扫描,启动分析程序等功能;
(4)全数字交换系统,避免了色谱信号需要多重模-数转换带来的 信号畸变与干扰。
✦WS600色谱工作站
(1)具有液相色谱系统控制和色谱数据处理双重功能;
(2)六种定量计算方法;
(3)多重不同浓度的标准试样校准运行,建立样品浓度-面积校正曲线;
(4)灵活的峰识别和处理能力;
(5)色谱图形、定量计算方式、峰处理参数及峰鉴定表等可保存到用户自命名的文件中。
✦具有自动在线检测功能
液相色谱原理:储液器中的流动相由高压泵泵入系统,样品溶液通过注射器进入流动相,流动相装柱(固定相)。由于样品溶液中的组分在两相中的分配系数不同,当它们相对运动时,会经历重复的时间。在吸附-解吸分配过程中,各组分的移动速度差异很大。它被分离成单一组分,依次流出色谱柱。当通过检测器时,样品浓度被转换成电信号并传输到记录仪。这些数据可以用图表的形式打印出来,供研究人员分析。