液相色谱柱流动相流速的选择
液相色谱柱流动相流速的选择:
因液相色谱柱柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的色谱柱柱效。对于一根特定的液相色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。
当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变色谱柱流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间,如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量。
a.由于甲醇廉价,对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外):PS由于反相色谱柱比较难以选择,所以对于反相色谱柱柱推荐选择这款几款反相色谱柱。
b.对于正相柱推荐使用沸程为30-60℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相,没有提纯的己烷不得使用。用水最好使用超纯水(电阻率大于18兆欧),去离子水及双蒸水中含有酚类杂质,有可能影响分析结果。
c.含水液相色谱柱流动相最奸在实验前配制,尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。最好加入叠氮化钠,防止细菌生长。
d.色谱柱流动相要求使用0.45 μm滤膜过滤,除去微粒杂质。
e.使用HPLC级溶剂配制流动相,使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命,提高柱性能。
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