阿莫西林高效液相色谱检测方案
【阿莫西林】
阿莫西林:又名安莫西林或安默西林,是一种最常用的半合成青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素,为 一种白色粉末,半衰期约为 61.3 分钟。在酸性条件下稳定,胃肠道吸收率达 90%。阿莫西林杀菌作用强, 穿透细胞膜的能力也强。是目前应用较为广泛的口服半合成青霉素之一,其制剂有胶囊、片剂、颗粒剂、 分散片等等,现在常与克拉维酸合用制成分散片。
【性质】
CAS 号:26787-78-0
英文名:AMOXICILLIN
分子式:
C16H19N3O5S·3H2O
分子量:419.46
【药理作用】
1、阿莫西林为半合成广谱青霉素类药,抗菌谱及抗菌活性与氨苄西林基本相同,但其耐酸性较氨苄西 林强,其杀菌作用较后者强而迅速,但不能用于脑膜炎的治疗;
2、对大多数致病的 G+菌和 G-菌(包括球菌和杆菌)均有强大的抑菌和杀菌作用,对肺炎链球菌、溶血 性链球菌等链球菌属、不产青霉素酶葡萄球菌、粪肠球菌等需氧革兰阳性球菌,大肠埃希菌、奇异变形菌、 沙门菌属、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需氧革兰阴性菌的不产β内酰胺酶菌株及幽门螺杆菌具有良好的抗菌活性。
药物及其杂质的定量、定性分析是药物质量控制和安全性检测的必须环节。以下是科捷利用LC600A高效液相色谱仪对阿莫西林进行的HPLC检测方案
【阿莫西林高效液相色谱检测方案】
1、仪器与试剂
1.1 仪器、设备
LC-600A 高效液相色谱仪
C18:250mm×4.6mm×5μm
分析天平
容量瓶
超声波清洗器
PH 计
针式过滤器
微孔滤膜:0.45µm
1.2 试剂
乙腈(HPLC)
磷酸二氢钾(AR)
氢氧化钾(AR)
2、供试品溶液的制备
供试品溶液的制备:精密称取供试品约 25mg,置 50ml 容量瓶中,加流动相溶解并定量稀释至刻度, 摇匀,经针式过滤器过滤,即得。
3、色谱条件
色谱柱:
Vertex C18(250mm×4.6mm×5μm)
流动相:
流动相 A:流动相B=2.5:97.5
配制方法:流动相 A:乙腈
流动相 B:0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液(用 2mol/L 氢氧化钾溶液调节 PH 值为 5.0)
波长:254nm
流速:1. 0 mL/min
进样量:20ul
温度:室温
4、测定法
精密吸取供试品溶液 60ul,注入液相色谱仪,测定,即得
5、谱图
【仪器配置】
【主要仪器介绍】
LC600A高效液相色谱仪
LC600A 高效智能全控液相色谱仪由 P600 高压恒流泵与 UV600 紫外检测器直接构成等度 / 梯度分析系统。使用 WS600 工作站可以同时控制数台 P600 高压恒流泵、UV600 紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。
性能特点
01、LC-P600 高压恒流泵
(1)往复式并联泵设计,流量精度高,压力脉动小,延长密封圈和
活塞杆的使用寿命;
(2)隔膜式秒冲阻尼器与电子脉动抑制技术同时控制压力脉动保障
最低的基线噪音;
(3)整体性单向阀,结构简单,密封性好;
(4)柱塞杆自动缩进,方便更换密封圈;
(5)可选配注后清洗功能,适用于使用含缓冲盐的分析条件。
02、UV600 紫外检测器
(1)平行双锥孔设计的流动池,大幅提高信噪比,检测效果更佳;
(2)开机自检功能,通过图谱上 486.6nm 和 656nm 这二点的位置,以判断波长示值误差的准确性,保证极优的波长精度,保障仪器最佳状态;
(3)控制电路采用多微处理器结构,分别管理信号采集、数据处理、系统控制和通信。在做等度分析时,可以方便的通过全汉字的液晶屏与七个功能键,设置波长、滤波常数、输出量程、运行时间等参数。并且可以实现开关氘灯,光谱扫描,启动分析程序等功能;
(4)全数字交换系统,避免了色谱信号需要多重模、数转换带来的信号畸变与干扰。
03、WS600 色谱工作站
(1)具有液相色谱系统控制和色谱数据处理双重功能;
(2)六种定量计算方法;
(3)多重不同浓度的标准试样校准运行,建立样品浓度 - 面积校正曲线;
(4)灵活的峰识别和处理能力;
(5)色谱图形、定量计算方式、峰处理参数及峰鉴定表等可保存到用户自命名的文件中。
04、具有自动在线检测功能